This work shows the possibility of determination of T-lymphocyte percentage in blood by light scattering pattern only. The analysis of lymphocytes was carried out by scanning flow cytometry with measurement light scattering and specific fluorescence simultaneously. The fluorescence was caused from fluorochrom radiation which was connected with monoclonal antibody. The analysis of light scattering from different lymphocyte subpopulations allowed reveal the dependence distribution asymmetry of T-lymphocyte percentage. This method resulted in determination of T-lymphocyte percentage with mistake less then 4,5 %. The analysis by this method takes 10–15 minutes as the same time immunofluorescence analysis takes several tens of minutes. Thus, our method develops a potential of scanning flow cytometry in carrying out bulk hematological analysis.
В работе продемонстрированы возможности светорассеяния в определении доли Т-лимфоцитов в периферийной крови человека. Анализ лимфоцитов проводился на сканирующем проточном цитометре с одновременным измерением светорассеяния и специфической флуоресценции одиночных клеток. Флуоресценция была вызвана излучением флуорохрома, связанного с моноклональным антителом, специфичным к определенному типу лимфоцитов. Анализ особенностей светорассеяния лимфоцитами различных типов позволил выявить зависимость асимметрии распределения параметров светорассеяния лимфоцитов от доли Т-лимфоцитов в пробе. Метод обеспечил определение доли Т-лимфоцитов в крови с ошибкой не хуже чем 4,5 %. Анализ по предложенной нами методике занимает 10–15 минут, в то время как иммунофлуоресцентный анализ занимает десятки минут. Таким образом, разработанный нами метод развивает потенциал сканирующей проточной цитометрии в проведении общего гематологического анализа.
